λDNA/ EcoR Ⅰ Marker
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目录号 包装 价格 |
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PBZ0310-1 50μg 90元
PBZ0310-2 100μg 160元 |
*概述:λDNA/EcoR Ⅰ Marker是由λDNA经EcoR Ⅰ完全酶切并经灭活处理制成,浓度0.5μg/μL。已含有1xLoading Buffer,可以直接电泳。由6条片断组成:3530bp、4878bp、5643bp、5804bp、7421bp和21226bp。上样量0.5~1μg。 *储存:-20℃保存一年以上,4℃保存2~3个月
1×Loading Buffer说明:
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Glycerol 5% |
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溴酚兰 0.02% |
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二甲苯腈蓝 0.02% |
1×loading Buffer中含有溴酚兰(Bromophenol Blue) 、二甲苯腈蓝FF
(Xylene Cyanol FF)两种色素,用以判断DNA片断的电泳情况。溴酚蓝在琼脂糖凝胶中迁移速率是二甲苯腈蓝FF的2.2倍,这一特性与琼脂糖浓度无关。在0.5XTBE琼脂糖凝胶电泳中溴酚蓝迁移速率约与长300bp的线状双链DNA相同,而二甲苯腈蓝FF约与长4000bp的DNA相同。上述关系在浓度范围
0.5%~1.4%的琼脂糖凝胶中基本不受浓度变化的影响。
*注意事项
1. 电泳时电压不应超过20V/cm,电压过高,会导致电泳缓冲液发热从而影响DNA电泳效果。另外,DNA分子泳动过快,小片段DNA分子可能会跑出凝胶,而导致DNA片段丢失。
2. 对于λDNA cos位点,该位点退火之后,λDNA/ HindⅢ Marker的4361bp片段以及λDNA/ HindⅢ+EcoR Ⅰ Marker的3530bp片段可能全部或部分消失,为避免由于片段退火而产生DNA代带型的变化,应在点样前放在
65℃水浴中加热10min,然后在冰浴中冷却5min。
3. 一般情况下,0.5cm宽的梳子加样量为0.5μg的DNA量,即本产品点样量
5 μl左右。当加样孔大时,样品上样量应相应加大,否则会造成条带浅甚至辨认不清楚,反之则应当减少加样量,但是上样过多会造成片段脱尾或弥散,特别是对于较大DNA片段尤为明显。
4. DNA Marker中的小片段可能会在长时间电泳之后条带变得很弱,应选择合适电泳时间,或者加大EB浓度。
5.在DNA Marker的储存或使用过程中应避免反复冻融,长期冷冻保存过程中,可能会形成DNA浓度梯度,使用时应在解冻后进行振荡混合并进行短暂离心。 |