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       pfu DNA聚合酶是从高温嗜热菌Pyrococcus furiosis分离出的高保真(High Fidelity)耐高温DNA聚合酶。pfu能纠正DNA扩增(PCR)过程中产生的错误，而传统的Taq DNA Polymerase, Tth DNA Polymerase及它们的变体如AmpliTaq, KIenTaq等都不能。高温DNA聚合酶Vent DeepVent, Tli, Pwo, pfu, UITma等具有校正功能(Proof reading),但是pfu是目前己发现的所有高温DNA聚合酶中在扩增DNA时出错率（er- ror rate）最低的。它比Taq DNA Polymerase及变体低10倍，比Vent和Pwo低2-4倍，比UITma低30倍。pfu的超常纠错特性是由该酶本身的性质决定的。其它高温DNA聚合酶与pfu混合使用，可以部分降低产品的错误率，但是效果达不到单独使用pfu的高保真率。在基因克隆和表达，基因突变分析等现代分子生物学操作中，由于对DNA扩增产物的正确率要求特高，常常希望万无一失，所以pfu是公认取代Taq DNA聚合酶的首选高保真高温DNA聚合酶。

 

编 号	品   名	产 地	规 格	价 格
A222-1	Pfu DNA Polymerase	国产	100u	70.00
A222-2		国产	200u	120.00
A222-3		国产	1000u	550.00
A223-1	Pfu DNA Polymerase超纯型	国产	100u	110.00
A223-2		国产	1000u	900.00

1> 此酶为工程菌酶，保真度最高，3＇端不加“A”。

2> 此酶适用于基因的高保真克隆和表达。

3> 有3＇—5＇外切核酸酶活性（高保真）；无5＇—3＇外切核酸酶活性。

4> 储存buffer同Taq DNA Polymerase。

5> 10×PCR buffer同Taq DNA Polymerase.。

6> PCR反应dNTP为0.2mM。

 

One unit of enzyme catalyzes the incorporation of 10nanomoles of deoxyrihonucleotides into a polynucleotide fraction(adsorbed on DE-81) in 30min at 72℃

Concentration:2u/ul

Components:Pfu DNA Polymerase, 10×PCR Reaction Buffer, and Mg^2＋ Buffer (Optional)

· Hig h Fidelity: Pfu DNA Polymerase eSLibits the lowest error rate of any thermostable enzyme.

· Flexible: Choose either Pfu with 10 × Reaction Buffer and separate 20mM Mgcl2 or Pfu with 10 × Reaction Buffer containing  20mM Mgcl2                                                                        ..

Quality Control:ested for the absence of endo-,exodeoxyribonucleasas and for amplification of a 950mic DNA. 

Pfu DNA polymerase is recommended for use in PCR, primer extension reactions and other applications that demand high fidelity,including:

· Cloning.

· DNA expression.

· Mutation analysis

Storage: -20℃ for one year.

注意事项

1）Pfu扩增效率通常比Taq酶差，这是由于pfu具有3'-5'的外切酶活性（高保真性）所引起的，不是由于pfu酶的质量不稳定所致。pfu在扩增2kb以下的ONA片段和Taq酶差别不大。

2)10 X pfu PCR Buffer中已含有Mgt用该缓冲能保证扩增产物的保真性。提高反应体系的PH和Mg2+浓度能部分提高DNA扩增的产率，但产物的保真性将有所下降。不提倡用Taq PCR反应缓冲代替pfu缓冲做高保真扩增。

3）用pfu扩增时，引物的纯度要求较高，长度要求大于18 base  Tm在55-80℃之间。引物的浓度在0.1-0.5uM之间，比Taq略高。Pfu具有3'-5'的外切酶活性可能会降解引物，特别是溶液中没有dNTP的情况下。所以，pfu必须是最后加入到反应体系中，并立即进行PCR反应。

4) pfu的热稳定性比Taq酶略高，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，而不会影响pfu的活性。

 

Storage：-20 0C