蛋白质电泳相关试剂及缓冲液

30％（W/V）丙烯酰胺溶液 ﹡组分浓度   30％（W/V） Acrylamide ﹡配制量     100ml ﹡配制方法   1．称取下列试剂，置于250ml烧杯中。 Acrylamide         29g BIS                 1g 2．向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45μm滤膜过滤除杂。 3．置于棕色瓶中4℃保存。 （注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性。配制时应戴手套操作）

40％（W/V）丙烯酰胺溶液 ﹡组分浓度   40％（W/V） Acrylamide ﹡配制量     100ml ﹡配制方法   1．称取下列试剂，置于200ml烧杯中 Acrylamide           38g BIS                   2g 2．向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45μm滤膜过滤除杂。 3．置于棕色瓶中4℃保存。 （注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性。配制时应戴手套操作）

10％（W/V）过硫酸铵 ﹡组分浓度   10％（W/V） 过硫酸铵 ﹡配制量     10ml ﹡配制方法   1．称取1g过硫酸铵。 2．加入10ml的去离子水后搅拌溶解，贮存于4℃。 （注意：10％过硫酸铵溶液在4℃保存能使用两周左右，过期会失去催化效果）

5X Tris－Glycine Buffer ﹡组分浓度  0.125M Tris，1.25M Glycine，0.5％（W/V） SDS ﹡配制量     1L ﹡配制方法   1．称取下列试剂，置于1L的烧杯中                                          Tris                15.1g                                          Glycine               94g                                          SDS                  5.0g 2．加入约800ml的去离子水，搅拌溶解。 3．加入去离子水定容至1L后，室温保存

2X SDS－PAGE Loading Buffer ﹡组分浓度    100mM             Tris－HCl （pH 6.8）                                           4％（W/V）        SDS 0.2％（W/V）      溴酚蓝 20％（V/V）       甘油 2％（W/V）        β－巯基乙醇 ﹡配制量     5ml ﹡配制方法   1．称取下列试剂，置于15ml塑料离心管中                                                         1M Tris－HCl （pH 6.8）     0.5ml                                                         SDS                         0.2g                                                         溴酚蓝                      10mg                                                         甘油                        1ml 2．加入去离子水溶解定容至5ml。 3．小份分装，0.5ml一管，室温保存。 4．使用前将25μl的β－巯基乙醇加入混匀。

5X SDS－PAGE Loading Buffer ﹡组分浓度    250mM              Tris－HCl （pH 6.8）                                         10％（W/V）        SDS 0.5％（W/V）      溴酚蓝 50％（V/V）       甘油 5％（W/V）         β－巯基乙醇 ﹡配制量     5ml ﹡配制方法   1．称取下列试剂，置于15ml塑料离心管中                                          1M Tris－HCl （pH 6.8）     1.25ml                                          SDS                         0.5g                                          溴酚蓝                      25mg                                          甘油                        2.5ml                                          2．加入去离子水溶解定容至5ml。                                          3．小份分装，0.5ml一管，室温保存。                                          4．使用前将25μl的β－巯基乙醇加入混匀。